SIRT1激活对创伤性颅脑损伤后神经元铁死亡作用的实验研究
摘要：
目的:初步探讨沉默信息调节因子1（SIRT1）激活是否通过调节缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）介导的糖酵解，对创伤性颅脑损伤（TBI）后神经元铁死亡起抑制作用。方法:（1）将6只SD大鼠采用随机数字表法分为假手术组与TBI组，每组3只。TBI组大鼠采用液压冲击法制备成TBI模型，假手术组大鼠进行相同手术操作但不进行打击。送检2组大鼠皮质组织进行串联质谱标签标记定量蛋白组学检测，以分析差异表达蛋白质谱，并对筛选出的差异蛋白进行京都基因与基因组百科全书（KEGG）分析、基因集富集分析（GSEA）。（2）将12只SD大鼠采用随机数字表法分为假手术组及TBI后1 d、3 d、7 d组，每组3只，处理方式同上。采用蛋白质印迹法检测各组大鼠脑组织中SIRT1蛋白表达。（3）将48只大鼠采用随机数字表法分为假手术组、TBI组、TBI+媒介物组、TBI+SIRT1激活剂组，每组12只。假手术组、TBI组大鼠处理方式同上，TBI+SIRT1激活剂组大鼠于造模后30 min内经腹腔注射SRT1720（溶于≤5%二甲基亚砜中，剂量为20 mg/kg）、2次/d（间隔12 h），TBI+媒介物组大鼠同期注射等剂量二甲基亚砜。造模后1 d时，应用改良神经功能缺损评分（mNSS）评估各组大鼠的神经功能缺损程度，采用干湿重法检测脑组织含水量，采用HE染色观察损伤处皮层组织学变化，采用透射电镜观察神经元线粒体超微结构变化，采用比色法检测皮层组织中丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性，采用蛋白质印迹法检测皮层组织中SIRT1、糖酵解通路关键蛋白HIF-1α、铁死亡通路关键蛋白谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）及酰基辅酶A合成酶长链家族成员4（ACSL4）蛋白表达。结果:（1）KEGG分析显示TBI组大鼠皮层组织中糖酵解通路、HIF-1信号通路较假手术组表现出显著富集，GSEA显示TBI组大鼠皮层组织中HIF-1信号通路（mmu04066）、铁死亡通路（mmu04216）基因集均较假手术组表现出富集趋势。（2）与假手术组比较，TBI后1 d、3 d、7 d组大鼠皮层组织中SIRT1蛋白表达明显降低，差异均有统计学意义（
P<0.05），其中TBI后1 d组SIRT1蛋白表达下降最明显。（3）与TBI+媒介物组比较，TBI+SIRT1激活剂组大鼠的mNSS评分[（9.83±1.17）分比（7.66±1.21）分]、脑组织含水量[（83.62±0.91）%比（80.09±0.68）%]明显降低，差异均有统计学意义（
P<0.05）。HE染色提示TBI+SIRT1激活剂组大鼠损伤处皮层的组织结构较TBI+媒介物组清楚，神经元形态也有明显改善；透射电镜观察到TBI+SIRT1激活剂组大鼠神经元线粒体皱缩较TBI+媒介物组减轻，嵴结构部分恢复。与TBI+媒介物组比较，TBI+SIRT1激活剂组大鼠皮层组织中MDA含量明显降低[（62.72±9.20）nmol/g比（39.34±3.48）nmol/g]，SOD活性明显升高[（1.95±0.23）U/mg比（2.48±0.14）U/mg]，GPX4蛋白表达明显升高（0.37±0.04比0.46±0.03），HIF-1α、ACSL4蛋白表达明显降低（1.16±0.15比0.81±0.12、1.14±0.06比1.29±0.04），差异均有统计学意义（
P<0.05）。
结论:激活SIRT1可通过降低HIF-1α介导的糖酵解，抑制TBI后神经元铁死亡，起到神经保护作用。
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作者：
靳婕,安婷婷,吴琼,李向阳,马轶凡,丁慧慧,宋涛,李成建,徐兰娟
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刊名：
中华神经医学杂志
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年期：
2025.8
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